云顶国际

基于CRISPR技术的非病毒模式的细胞治疗开发凭借其成本低,通量高和更安全的特点,逐渐受到更多关注,也为细胞治疗商业化过程中,暴露出来的慢病毒载体短缺导致产能和推广受限问题,提供了解决方案。

云顶国际推出“非病毒细胞疗法-CRISPR基因敲入优化试剂盒”,试剂盒包含sgRNA,Cas蛋白,单链/双链敲入模板,用于验证和优化T细胞,NK细胞,iPSC等细胞基因敲入效率,推进支持基于CRISPR技术敲入CAR,TCR等序列非病毒细胞治疗开发,具有以下优势:

高效的验证优化


含EGFP或GFP报告基团,快速优化实验体系、提升敲入效率

经济快速的测试


现货快至3个工作日,较之定制试剂节省75%经费

灵活的试剂组合


可选任意一个或多个组分

序列经优化与验证


每个批次产品均经过验证,敲入效率高达57%

试剂盒组分

化学合成sgRNA

  • HPLC纯化的SafeEdit sgRNA
  • TRAC、RAB11A敲入位点可选

高纯度Cas9蛋白

  • 野生型(WTSpCas9)和增强型(eSpCas9)均可选择

基因敲入(HDR)模板

  • 单链ssDNA/共价闭合双链dsDNA敲入模板可选
  • 可添加CTS设计提升敲入效率

基因敲入增强剂(Enhancer)*

  • iPSC/T细胞等多种细胞,多个位点验证
  • 显着提升敲入效率高达2.4倍

* 欢迎咨询基因敲入增强剂(Enhancer),您可以联系技术支持了解详情或订购,邮箱: oligo@gdztsport.com ,电话:400-025-8686转5812或5815。

试剂盒定制

1. 请选择您需要的目的基因敲入位点:

  • TRAC : 适用于T细胞,常用的CAR序列敲入位点,sgRNA针对TRAC位点的第一个外显子区域设计
  • RAB11A : 通用的管家基因,适用于T细胞、NK细胞、巨噬细胞、iPSC细胞等具有RAB11A 位点的更广泛的细胞
  • 备注 :其他位点请选择 定制化sgRNA基因敲入(HDR)模板合成服务

2. 请选择您需要的基因敲入模板:

  • 野生型Cas9蛋白 : 科研级,包含一个核定位信号(NLS)
  • 特异性增加型eSpCas9-2NLS蛋白 : 通过在SpCas9 (K848A/K1003A/R1060A) 两端增加核定位信号(NLS)去提升基因编辑的靶向特异性,更稳定,在提升编辑效率的同时可以降低10倍以上的脱靶效率1

3. 请选择您需要的基因敲入模板:

  • GenExact? ssDNA: 单链模板
  • GenWand? dsDNA: 双端共价封闭双链模板
  • GenEaxct? ssDNA和GenWand? dsDNA: 推荐同时选择两者,比较选择合适您实验体系的敲入模板类型

4. 您是否需要在您的基因敲入模板上增加CTS序列去提升敲入效率?
    (CTS设计提升编辑效率的方案详见和案例分享 ,实验操作详见操作指南)

  • 需要 :CTS序列让 RNP(Cas9+sgRNA)结合至敲入模板两端,促进模板进入细胞核,提升敲入效率,单链模板需要配合退火引物使用
  • 不需要

试剂盒产品详情

请查收您的定制化试剂盒,按照《云顶国际的实验操作指南》的推荐试剂剂量,可以用于约12个反应的实验(Lonza 4D电转平台),或用于25个反应的实验(Neon电转平台),您可以根据您的实验体系和试剂用量增减产品数量,确保每个组分的交付量足够支持您开展实验。

货号 产品名称 数量
KIOK1-1.5
SafeEdit TRAC sgRNA - 1.5 nmol
KIOK1-3
SafeEdit TRAC sgRNA - 3 nmol
KIOK1-6
SafeEdit TRAC sgRNA - 6 nmol
KIOK2-1.5
SafeEdit RAB11A sgRNA - 1.5 nmol
KIOK2-3
SafeEdit RAB11A sgRNA - 3 nmol
KIOK2-6
SafeEdit RAB11A sgRNA - 6 nmol
KIOK3-100
Ultra eSpCas9 - 100 μg
KIOK3-200
Ultra eSpCas9 - 200 μg
KIOK3-400
Ultra eSpCas9 - 400 μg
KIOK4-100
Ultra WTSpCas9 - 100 μg
KIOK4-200
Ultra WTSpCas9 - 200 μg
KIOK4-400
Ultra WTSpCas9 - 400 μg
KIOK5
ssDNA_TRAC_EGFP - 50 μg
KIOK6
ssDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg
KIOK7
dsDNA_TRAC_EGFP - 50 μg
KIOK8
dsDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg
KIOK9
ssDNA_RAB11A_GFP - 50 μg
KIOK10
ssDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg
KIOK11
dsDNA_RAB11A_GFP - 50 μg
KIOK12
dsDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg
KIOK13
TRAC CTS Annealing Oligo - 2 nmol
KIOK14
RAB11A CTS Annealing Oligo - 2 nmol

备注:ssDNA选择含CTS模板必须配套使用对应位点的退火引物,dsDNA本身即为双链无需退火

您可以根据实际需求选择加购以下产品:

货号 产品名称 数量
KIOK3-100
Ultra eSpCas9 - 100 μg
KIOK3-200
Ultra eSpCas9 - 200 μg
KIOK3-400
Ultra eSpCas9 - 400 μg
KIOK4-100
Ultra WTSpCas9 - 100 μg
KIOK4-200
Ultra WTSpCas9 - 200 μg
KIOK4-400
Ultra WTSpCas9 - 400 μg

参考文献

技术资源

标题
基因敲入优化试剂盒实验操作指南
  • 基因敲入实验步骤与试剂比例
  • CTS序列实验操作步骤
  • Enhancer使用步骤
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标题
《UCSF基因编辑应用于细胞治疗实例材料》
  • 含CTS序列敲入模板如何提升基因编辑效率?
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常见问题

相关服务

如您有任何问题请联系云顶国际
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